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微生物室實(shí)習(xí)總結(jié)

時(shí)間:2023-08-11 17:45:02 澤楠 實(shí)習(xí)總結(jié) 投訴 投稿
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微生物室實(shí)習(xí)總結(jié)(通用7篇)

  緊張而又充實(shí)的實(shí)習(xí)生活結(jié)束了,回顧過去的實(shí)習(xí)經(jīng)歷,倍感充實(shí),收獲良多,需要好好地寫一份實(shí)習(xí)總結(jié)了。為了讓您不再為寫實(shí)習(xí)總結(jié)頭疼,下面是小編幫大家整理的微生物室實(shí)習(xí)總結(jié),僅供參考,歡迎大家閱讀。

微生物室實(shí)習(xí)總結(jié)(通用7篇)

  微生物室實(shí)習(xí)總結(jié) 1

  在這次見習(xí)中,我和其他三位同學(xué)被一起分到了微生物科。在微生物科負(fù)責(zé)我們見習(xí)工作的是一位韓老師,他為人很隨和,給我們布置的見習(xí)任務(wù)就是每個(gè)人跟蹤一種類型的臨床標(biāo)本。他要求跟蹤從標(biāo)本被送到微生物科開始一直到得出最終的報(bào)告為止并把從中的所見所得記錄下來,通過這樣一個(gè)過程讓我們能夠?qū)ξ⑸锟朴斜M可能多的了解。除此之外,韓老師還讓我們了解一下里面的一些大型自動化儀器的用途及操作方法,為我們以后能更快的適應(yīng)實(shí)習(xí)做準(zhǔn)備。

  見習(xí)的第一天,我們看的是標(biāo)本的接種,我們看過那里的老師熟練的接種過程后深感自己平時(shí)做實(shí)驗(yàn)室的速度是如此之慢,如果以我們這種速度去完成每天要接種上百個(gè)標(biāo)本的臨床工作是根本不可能的。此外我們還看了臨床上的革蘭染色,發(fā)現(xiàn)它與我們做實(shí)驗(yàn)時(shí)有一些不同,主要區(qū)別是在染料上,臨床上為了提高染色速度都用了快速染料。總之,這一天的見習(xí)讓我們了解到的就是效率在臨床上是十分重要的。

  見習(xí)的第二、第三天,我們看的是臨床標(biāo)本的鑒定,對某些細(xì)菌,臨床上有經(jīng)驗(yàn)的老師只要通過觀察菌落特征、氣味及其他一些簡單物理性狀就可以初步判斷出是何種細(xì)菌,讓我們大感吃驚?剖依镞有一位很熱心的老師在她空閑的時(shí)候向我們詳細(xì)的講解了一番在臨床上一些常見微生物的鑒定方法,聽過之后讓我們受益匪淺。見習(xí)的第四天,我們看的是臨床標(biāo)本的藥敏反應(yīng)。在這一天里,我們詳細(xì)的了解了臨床上是如何做藥敏反應(yīng)的,以及不同的微生物需要做哪些藥敏反應(yīng),這些都是我們在課堂上所無法學(xué)到的寶貴知識。

  最后一天,我們看的是微生物科是如何做質(zhì)控的。通過這一天的見習(xí),使我們深刻了解到質(zhì)控對于檢驗(yàn)科的重要性。之前,我們只是從書本上了解到其對于檢驗(yàn)這一學(xué)科是很重要的,但是無法有深切的體會,這次見習(xí)給了我們一次很好的機(jī)會能讓我們在實(shí)踐中認(rèn)識到它。除了這些以外,我們每天還在科室里老師有空的時(shí)候讓他們給我們講解了一番微生物科中各種孵育箱的作用、ATB儀器的`操作方法及其他一些儀器的用途和操作方法,讓我們對微生物科有了更全面的了解。

  五天的時(shí)間眨眼就過去了,我的見習(xí)也在不知不覺中圓滿結(jié)束了,能學(xué)到的東西卻比我們在學(xué)校一個(gè)月學(xué)到的還多。回想這段時(shí)間的生活,我覺得自己過的很充實(shí),也很快樂,更重要的是我學(xué)到了不少東西。我相信,這段時(shí)間的收獲將是我人生中的一筆寶貴的財(cái)富。我也相信,通過這次見習(xí)的鍛煉,將幫助我能更快的融入到即將到來的實(shí)習(xí)生活中以及以后的工作中。

  微生物室實(shí)習(xí)總結(jié) 2

  歲月如梭,光陰似箭,不知不覺在微生物室實(shí)習(xí)的時(shí)間已接近尾聲了。

  回想這兩個(gè)月在微生物室實(shí)習(xí)的這三個(gè)月時(shí)間里在指導(dǎo)老師的帶領(lǐng)下自己真的學(xué)會了不少。通過自己的勤奮在積極協(xié)助老師完成細(xì)菌學(xué)方面檢驗(yàn)項(xiàng)目的同時(shí),我發(fā)現(xiàn)自己的操作能力不說有了很大程度的提高但也有了更大的進(jìn)步了,相比在學(xué)校的時(shí)候操作起來更熟練了。比如在利用顯微鏡看細(xì)菌形態(tài)的.時(shí)候,以前調(diào)顯微鏡亮度、找視野等就要弄好幾分鐘,現(xiàn)在通過在醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物室三個(gè)月的實(shí)習(xí),這些小問題都不存在了,而且通過染色在顯微鏡下能辨認(rèn)的細(xì)菌也比較多了,像球菌科的葡萄球菌感染、鏈球菌、淋球菌以及桿菌科的腸桿菌,真菌孢子在顯微鏡下也能一眼辨認(rèn)。

  總之在微生物三個(gè)月的實(shí)習(xí)日子里感覺自己受教頗多,通過親身實(shí)踐操作把自己在學(xué)校學(xué)到的理論知識同實(shí)踐很好的結(jié)合了起來,從而更進(jìn)一步加深了自己的細(xì)菌學(xué)知識底蘊(yùn),在帶教老師的悉心指導(dǎo)下已熟悉掌握了各類標(biāo)本的接種、細(xì)菌培養(yǎng)以及細(xì)菌的初步鑒定、細(xì)菌的藥敏試驗(yàn)等。

  在此做次總結(jié)為自己更好的回顧在醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物室所學(xué)。

  微生物室實(shí)習(xí)總結(jié) 3

 。ㄒ唬、實(shí)習(xí)內(nèi)容

  1、在實(shí)習(xí)中,認(rèn)識和學(xué)習(xí)到了許多平時(shí)不易見到的真菌,并通過查找資料了解了他們的分類地位和形態(tài)結(jié)構(gòu)特征及作用。

  2、在實(shí)習(xí)中,把課本知識與實(shí)際經(jīng)驗(yàn)相結(jié)合,把理論運(yùn)用與實(shí)踐中,融會貫通,對微生物尤其是真菌的世界有了更多的了解。

  3、在實(shí)習(xí)中,和班上同學(xué)有了更多的交流機(jī)會,尤其是爬山時(shí)大家相互照顧,相互鼓勵(lì),晚上住在一起也相互關(guān)心,體會到了濃濃的同學(xué)情誼。

 。ǘ(shí)習(xí)中的感悟

  1、我們所學(xué)的課本知識都只是理論的東西,只有通過實(shí)踐才會真正理解與掌握并加以運(yùn)用。

  2、同學(xué)之間之間的相互合作腳趾一個(gè)人孤軍奮戰(zhàn)往往可以達(dá)到事半功倍的'效果,同學(xué)之間以及人與人之間只有多多交流相互關(guān)心才會有更加和諧的關(guān)系。

 。ㄈ、實(shí)習(xí)中的不足

  1、實(shí)習(xí)時(shí)間較短,所找到真菌相對較少。

  2、自己所學(xué)的知識和認(rèn)識的真菌太少,今后的學(xué)習(xí)中有許多地方有待補(bǔ)充與提高。

  3、實(shí)習(xí)過程中未能很好的與老師及時(shí)交流,導(dǎo)致出現(xiàn)很多自己不懂的問題沒有得到解決。

  微生物室實(shí)習(xí)總結(jié) 4

  前言:病原微生物感染引起發(fā)病,院內(nèi)感染不斷增加。細(xì)菌由于人類不斷婪用抗菌藥物,耐藥性不斷增加,這些都嚴(yán)重危害人類健康。病原微生物在實(shí)驗(yàn)室潛在對實(shí)驗(yàn)室人員的威脅也日趨嚴(yán)峻。生物安全的宣教必不可少,怎樣把只有基本微生物知識的學(xué)生,與臨床實(shí)驗(yàn)室大量面對病人標(biāo)本的采集、運(yùn)送、接種、培養(yǎng)、觀察、鑒定、藥敏、報(bào)告等各個(gè)環(huán)節(jié)的實(shí)踐結(jié)合起來,由基礎(chǔ)知識向?qū)I(yè)技能有效轉(zhuǎn)化,把基礎(chǔ)理論知識在實(shí)習(xí)中有效發(fā)揮,與實(shí)踐相結(jié)合使之升華,是培養(yǎng)合格檢驗(yàn)人才的關(guān)鍵。現(xiàn)就微生物室的實(shí)習(xí)帶教體會總結(jié)如下。

  1、重視標(biāo)本送檢前的質(zhì)量控制。

  微生物實(shí)驗(yàn)室每天都收到來自病房,門診病人送檢的大量標(biāo)本,有痰、中段尿、傷口分泌物、生殖道拭子、血培養(yǎng)、膿液、術(shù)中臨時(shí)所采集的標(biāo)本等等。標(biāo)本的采集、運(yùn)輸和處理是否得當(dāng)及時(shí)對試驗(yàn)結(jié)論有直接影響。是分析前質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié),只有讓學(xué)生全面認(rèn)識標(biāo)本采集與處理的'全過程及影響因素,才能確保檢驗(yàn)結(jié)論的準(zhǔn)確性、有效性。

  1.1標(biāo)本的采集

  例如中段尿的采集,應(yīng)告知學(xué)生尿道內(nèi)是人體無菌的腔道,尿道外則是有菌的部位。所以采集中段尿時(shí)必須對外陰進(jìn)行徹底消毒,排出前一段尿液,以便沖洗外尿道或外陰,留取中段尿于無菌杯中送檢。如痰標(biāo)本的采集,應(yīng)囑病人于清晨嗽洗口腔,咳出深部的痰液于無菌杯中送檢,如是支原體和衣原體的檢測,則應(yīng)留取女性宮頸拭子或男性尿道拭子,因?yàn)橹гw和衣原體都只寄生在宮頸或者尿道的柱狀上皮細(xì)胞內(nèi)。

  1.2標(biāo)本的處理

  學(xué)生應(yīng)知道,標(biāo)本的及時(shí)處理接種對微生物的成活率至關(guān)重要,例如淋病奈瑟氏菌,需要保溫,保濕送檢,提倡床邊接種,培養(yǎng)基應(yīng)先預(yù)溫,接種后放36℃溫箱、5%co2環(huán)境,保濕培養(yǎng)。又如痰標(biāo)本應(yīng)接種在血平板,巧克力平板,沙基,嗜血流感巧克力平板上,血平板和巧克力平板主要觀察病人痰標(biāo)本里的基礎(chǔ)菌群的生長狀態(tài)。沙基主要觀察是否有念珠菌生長,嗜血流感巧克力平板主要是觀察是否有嗜血流感桿菌屬的生長,此平板在配制時(shí)加入了針對性抗菌藥物,能夠抑制革蘭氏陰性桿菌和革蘭氏陽性球菌的生長,只適合于嗜血桿菌屬的生長。學(xué)生應(yīng)學(xué)會每一份標(biāo)本,接種到相應(yīng)有用、有目的、有選擇的培養(yǎng)基中。

  2、注重特征、綜合分析

  細(xì)菌的鑒定是運(yùn)用所學(xué)知識,綜合性判斷的過程。它需要根據(jù)病人基本信息,標(biāo)本來源、診斷、平板上形態(tài)特征,生長情況,氧化酶、觸酶陰陽性狀、革蘭氏染色鏡下形態(tài),生化反應(yīng),藥敏結(jié)果等進(jìn)行綜合性判斷,最終得出鑒定結(jié)果。我們在帶教過程中應(yīng)根據(jù)以上信息,逐項(xiàng)分析,深入淺出,理論聯(lián)系實(shí)際,把學(xué)生在課堂中所學(xué)知識調(diào)動出來,溫故知新,對病人標(biāo)本的狀況加以充分闡述,循序漸進(jìn),循循誘導(dǎo)。加深學(xué)生在視覺、聽覺、嗅覺的印象。例如革蘭氏陰性桿菌和革蘭氏陽性球菌在血平板,巧克力平板是有區(qū)別的。革蘭氏陰性桿菌在平板上菌落直徑較大,約3-5mm,突起、圓形,濕潤、有光澤感,我把它比作面包。革蘭氏陽性球菌,在平板以上菌落直徑較小,約2-3mm,較前者小、圓形、濕潤。有光澤感,但不如前者,貼平板生長,我把它比作餅。一包一餅就簡單易記地把革蘭氏陰性桿菌和革蘭氏陽性球菌區(qū)分開來。使細(xì)菌菌落生活化,形象化,易于記憶。如銅綠假單胞在平板上菌落邊緣不整齊,有綠色素,菌落邊緣向外延長,培養(yǎng)時(shí)間越長菌落越大,有特殊的芳香氣味。學(xué)生通過芳香氣味等以上特征,進(jìn)一步識認(rèn)了銅綠假單胞菌。在常見的病人標(biāo)本中,所檢出的細(xì)菌菌落都具固有的特征和性狀,就像人與人之間通過性格,特征就能區(qū)分開來。我們也應(yīng)該把各種細(xì)菌在平板上的菌落特征加以描述,學(xué)生就較易接受學(xué)懂。

  3、培養(yǎng)學(xué)生自學(xué)能力和動手能力。

  ?坪捅究频膶W(xué)生在微生物室的實(shí)習(xí)時(shí)間大約有八至九周。在第一周,會安排學(xué)習(xí)培養(yǎng)基的制備,在此期間學(xué)習(xí)微生物室常用培養(yǎng)基的制備,如巧克力平板、SS平板、麥康凱平板、藥敏平板、營養(yǎng)瓊脂平板、淋基平板、肉湯管、雙糖管、TCBS平板、4號瓊脂平板等的制備過程。帶教老師將邊帶邊放手讓學(xué)生自己做一些基本的操作,如消毒平板、配制培養(yǎng)基,天平稱量,復(fù)溶瓊脂加血,倒平板等基本功的操作。第二周學(xué)習(xí)梅毒初篩,確證試驗(yàn)和血清學(xué)的一些試驗(yàn),也將學(xué)習(xí)衣原體、支原體的檢測方法。第三到九周將學(xué)習(xí)細(xì)菌的鑒定。用一至兩周時(shí)間學(xué)習(xí)各類標(biāo)本的接種,平板的選擇,平板分區(qū)劃線,熟練掌握接種的流程。第五周開始學(xué)習(xí)各類細(xì)菌的生化鑒定和藥敏試驗(yàn)。帶教老師應(yīng)結(jié)合平板上菌落形態(tài)。鏡下革蘭氏染色結(jié)果,各類平板上生長情況,病人的基本資料,診斷,本標(biāo)來源等基本信息分析評述給學(xué)生聽,逐步推論出細(xì)菌的大致方向,正確引導(dǎo)學(xué)生的思路。學(xué)生在每天應(yīng)對比較常見而且較有意義的細(xì)菌進(jìn)行鑒定,做生化反應(yīng)及藥敏試驗(yàn),通過四周自己動手操作,能對臨床上常見的細(xì)菌有一定的認(rèn)識,能把菌鑒定到種。通過實(shí)踐提高學(xué)生的動手能力,熟練掌握細(xì)菌室的基本操作技能。深化理論知識,使到理論與實(shí)踐融會貫通。提倡學(xué)生多提問,有疑問老師及時(shí)解答與學(xué)生的學(xué)習(xí)相動。

  微生物室實(shí)習(xí)總結(jié) 5

  歲月如梭,光陰似箭,不知不覺在微生物室實(shí)習(xí)的時(shí)間已經(jīng)結(jié)束了,但收獲頗豐。 通過積極協(xié)助老師完成細(xì)菌學(xué)方面檢驗(yàn)項(xiàng)目的同時(shí),自己的基礎(chǔ)操作能力有了很大程度的提高,操作起來熟練了非常多。而且通過染色在顯微鏡下能辨認(rèn)的細(xì)菌也更多了,像球菌科的葡萄球菌感染、鏈球菌、淋球菌以及桿菌科的腸桿菌,真菌孢子在顯微鏡下也能一眼辨認(rèn);全片查找結(jié)核桿菌的陽性率也提高了。

  對什么類型的標(biāo)本應(yīng)做什么平板接種,培養(yǎng)溫度等也有了進(jìn)一步的掌握,比如:痰標(biāo)本應(yīng)接種在血平板,巧克力平板,沙保平板而且還要做涂片染色以監(jiān)測痰標(biāo)本的'合格程度。血平板和巧克力平板主要觀察病人痰標(biāo)本里的基礎(chǔ)菌群的生長狀態(tài),沙保主要觀察是否有念珠菌生長。

  總之在微生物一個(gè)月的實(shí)習(xí)日子里感覺自己受教頗多,通過親身實(shí)踐操作把自己在學(xué)校學(xué)到的理論知識同實(shí)踐很好的結(jié)合了起來,在帶教老師的悉心指導(dǎo)下已熟悉掌握了各類標(biāo)本的接種、細(xì)菌培養(yǎng)以及細(xì)菌的初步鑒定、細(xì)菌的藥敏試驗(yàn)等。

  微生物室實(shí)習(xí)總結(jié) 6

  大三下學(xué)期5月份,我們動物檢疫專業(yè)的同學(xué)開始了為期2個(gè)多月的教學(xué)實(shí)習(xí),在眾多輔導(dǎo)老師之中,我有幸跟隨我校動物科技學(xué)院預(yù)防系的趙宇軍教授進(jìn)行學(xué)習(xí)。實(shí)習(xí)的地點(diǎn)就在我校動科樓的微生物實(shí)驗(yàn)室,以前我們曾在這里上過實(shí)驗(yàn)課,所以并不陌生。這次大家來到實(shí)驗(yàn)室為自行選擇課題進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作,我對世界聞名的金黃色葡萄球菌非常感興趣,在老師的帶領(lǐng)下進(jìn)行了相關(guān)食物中該菌的檢驗(yàn)。下面我們來回顧這次實(shí)驗(yàn)。

  一、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:

  食品中金黃葡萄球菌的檢測方法實(shí)驗(yàn)內(nèi)容金黃色葡萄球菌是一種引起人類和動物化膿感染的重要致病菌,也是造成人類食物中毒的常見致病菌之一。本菌廣泛分布于自然界,如空氣、土壤、水及其它環(huán)境中。在人類和動物的皮膚及外界相通的腔道中,也經(jīng)常有本菌存在。據(jù)報(bào)導(dǎo),在正常人群中的帶菌率可達(dá)30%~80%,其中皮膚帶菌率為8~22%,鼻腔和咽喉部等上呼吸道的帶菌率在40~50%以上,因此其可通過各種途徑和方式,尤其是經(jīng)工作人員的手和上呼吸道而污染食品。由于致病金黃葡萄球菌能產(chǎn)生腸毒素,故一旦細(xì)菌污染食品,并在合適的溫度環(huán)境下,細(xì)菌可以大量繁殖并產(chǎn)生腸毒素,從而引起消費(fèi)者食物中毒。由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒,在世界各國都極為普遍。特別是在北美及歐洲等地區(qū)發(fā)病率更高。在上述這些國家中,每年有金黃色葡萄球菌引起的食物中毒病例,僅次于沙門氏菌,而在細(xì)菌性食物中毒病例排到第2~3位,有此而造成的經(jīng)濟(jì)損失也相當(dāng)慘重,在我國由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒病例也時(shí)有報(bào)導(dǎo),所以目前世界各國都把金黃色葡萄球菌列為食品衛(wèi)生的法定檢測項(xiàng)目。我國對金黃色葡萄球菌目前采用的方法是以國家標(biāo)準(zhǔn)GB.4789-10-84及檢驗(yàn)檢疫系統(tǒng)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN.0172-92作為依據(jù)。

  整個(gè)檢測過程獲得最終結(jié)果須時(shí)5天左右,既費(fèi)時(shí)又費(fèi)力,并造成貨物積壓,也影響貨物的及時(shí)出運(yùn),并使貨主的倉儲成本提高,造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。多年來很多食品微生物實(shí)驗(yàn)室都在探索和尋找一些準(zhǔn)確性高,并快速的.檢測方法,最近我們分別從美國3M公司和法國生物梅里埃公司獲得兩種快速檢測致病性金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)基,其名稱為:

 、貾etrifilmRStPlate(由美國3M公司研制生產(chǎn)),是一種薄膜型快速檢測金黃色葡萄球菌的計(jì)數(shù)平板。

  ②Baird-parker+RPFAgar.(由法國生物梅里埃公司研制生產(chǎn)的用Baird-Parker瓊脂加免血漿纖維蛋白原的金黃色葡萄球菌檢測計(jì)數(shù)平板)。

  二、實(shí)驗(yàn)原理:實(shí)驗(yàn)原理:原理

  測試薄膜是由二部分組成。

  第一部分是由黃金色葡萄球菌培養(yǎng)基片,此培養(yǎng)基中含有經(jīng)修正的Barid-Parker,營養(yǎng)成分加上以冷水可溶解的膠質(zhì)。

  第二部分是一種耐熱核酸酶(TNase)反應(yīng)片,含有DNA及甲苯胺蘭(ToluidineBlue-O)及四唑指示劑(Tetraeolium)。此指示劑有助于菌落的計(jì)數(shù)及確定葡萄球菌耐熱核酸酶的存在。耐熱去氧核糖核酸(deoxyribonulcasDnase)為產(chǎn)毒金葡菌之典型特征,此酶非常耐熱,在100℃加熱30min,不易喪失活性,在130℃之下,其D值為16.6min,此酶之分子量為16800,等電點(diǎn)PH為9.6,耐熱去氧核糖酸與檢測血漿凝固酶相似,是一種鑒定金黃色葡萄球菌的方法,在檢測片上,耐熱DNA酶反應(yīng)看起來,呈粉紅色環(huán)帶包圍著一個(gè)紅色或蘭色的菌落。檢測片,必須與Peyrifilm耐熱核酸酶反應(yīng)片一起使用,單獨(dú)使用將不會顯示菌落,因?yàn)榫哂休o助計(jì)數(shù)菌落的指示劑是在反應(yīng)片上,而不是在檢測片上。Baird-parker+RPFagar,這一培養(yǎng)基中含有豐富的營養(yǎng)成分,其中以氯化鋰代替亞碲酸鉀,使菌落顏色呈黑色,RPF補(bǔ)充有兔血漿和牛纖維蛋白原,以便檢測凝固酶活力,胰酶可以抑制全部或部分圍繞凝固酶陽性菌落周圍沉淀暈環(huán)纖維蛋白的溶解,因此凡存在血漿凝固酶陽性的金黃色葡萄球菌,將在培養(yǎng)基中呈現(xiàn)有暈環(huán)的黑色菌落,即可確認(rèn),并作計(jì)數(shù)。

  微生物室實(shí)習(xí)總結(jié) 7

  1、目的

  通過實(shí)習(xí)使學(xué)生將理性知識與感性認(rèn)識有機(jī)地結(jié)合,將書本知識用于實(shí)驗(yàn),在實(shí)驗(yàn)中更深地理解基礎(chǔ)理論,提高學(xué)生的綜合能力與創(chuàng)新意識。通過實(shí)習(xí),掌握培養(yǎng)基的配制、分裝及滅菌方法;掌握微生物的接種技術(shù);掌握微生物的冷凍干燥保藏方法。

  2、要求

 。1)注重微生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)技能的掌握與提高,克服盲目追求新穎而忽視基礎(chǔ)的傾向;

  (2)課程實(shí)習(xí)前要預(yù)習(xí),明確每次實(shí)驗(yàn)的目的與基本步驟;

 。3)在實(shí)驗(yàn)中要有嚴(yán)緊的科學(xué)態(tài)度,尊重事實(shí)與實(shí)驗(yàn)結(jié)果,要善于發(fā)現(xiàn)新現(xiàn)象;

 。4)樹立密切合作的.風(fēng)氣,包括學(xué)生與老師、班與班、組與組、組長與組員之間的密切配合。

  二、實(shí)習(xí)內(nèi)容

  1、培養(yǎng)基的配制和滅菌。

  2、微生物(金葡菌)的接種。

  3、菌種的(金葡菌)的冷凍干燥保藏方法。

  4、日程安排:

  第一天實(shí)習(xí)課程的講授;實(shí)習(xí)工具、儀器和設(shè)備的準(zhǔn)備(包括培養(yǎng)基的配制、倒平板、金葡菌的活化、保護(hù)劑的配制)。

  第二天金葡菌由固體培養(yǎng)基轉(zhuǎn)接至液體培養(yǎng)基;準(zhǔn)備第三天的實(shí)驗(yàn)器具。第三天菌種凍干前的預(yù)處理。第四天菌種的凍干操作。第五天凍干機(jī)關(guān)機(jī),菌種保藏。

  三、主要材料和儀器設(shè)備

  天平、稱量紙、牛角匙、精密pH試紙、量筒、刻度搪瓷杯、試管、三角瓶、漏斗、分裝架、移液槍、培養(yǎng)皿、玻璃棒、燒杯、試管架、剪刀、酒精燈、硅膠塞、線繩、報(bào)紙、乳膠管、電爐、高壓滅菌鍋、干燥箱、牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂、金葡菌斜面培養(yǎng)物、接種環(huán)、凍干機(jī)、西林瓶、離心機(jī)、生化培養(yǎng)箱等。

  四、操作方法

  1.制備培養(yǎng)基

  2.配制保護(hù)劑:鮮牛奶3000r/min離心30min,棄去上層脂肪,加9倍體積生理鹽水,分裝,121℃(或116℃)高壓滅菌20min后備用。保護(hù)劑的作用可能是在冷凍干燥的脫水過程中代替結(jié)合水而穩(wěn)定細(xì)胞成分(細(xì)胞膜)的構(gòu)型,防止細(xì)胞膜因?yàn)閮鼋Y(jié)而破壞。保護(hù)劑還可以起支持作用,使微生物疏松地固定在上面。

  3.包2根離心管、4根大槍頭、2個(gè)西林瓶、1根8ml生理鹽水、1根保護(hù)劑,121℃滅菌20min。

  4.把菌種從平板培養(yǎng)物接種至平板培養(yǎng)基(菌種的活化):

 。1)把接種環(huán)放在酒精燈上消毒,消毒時(shí)應(yīng)使接種環(huán)完全燒紅;

 。2)待接種環(huán)冷卻后,用接種環(huán)從平板上沾取少許菌苔;

 。3)然后用接種環(huán)在平板培養(yǎng)基上畫線;

 。4)把平板培養(yǎng)基拿去37℃培養(yǎng)24h

  5.把菌種從平板培養(yǎng)物接種至液體培養(yǎng)基(液體接種法):

 。1)用接種環(huán)從平板上沾取少許菌苔;

  (2)在管內(nèi)靠近液面試管壁上將菌苔輕輕研磨并輕輕振蕩,或?qū)⒔臃N環(huán)在液體內(nèi)振搖幾次;

 。3)將液體肉湯培養(yǎng)基150r/min搖床37℃培養(yǎng)24h。

  接種液體培養(yǎng)物時(shí)應(yīng)特別注意勿使菌液濺在工作臺上或其他器皿上,以免造成污染。如有濺污,可用酒精棉球灼燒滅菌后,再用消毒液擦凈。凡吸過菌液的吸管或滴管,應(yīng)立即放入盛有消毒液的容器內(nèi)。

  6.把滅菌物品烘干備用

  7.拿出液體培養(yǎng)基:取出5ml菌液放入無菌離心管4000r/min離心20min,傾去上清液,再用5ml無菌生理鹽水將菌泥重新懸浮,再次4000r/min離心20min,傾去上清液,用5ml滅菌保護(hù)劑將菌泥重新懸浮,之后就可以分裝入西林瓶,每瓶1ml(液面高度3~5mm)。

  8.預(yù)凍:分裝好的菌種管放-80℃預(yù)凍2h,同時(shí)開啟凍干機(jī)的制冷機(jī),也可在凍干機(jī)的冷阱中預(yù)凍菌種。

  9.凍干:當(dāng)凍干機(jī)冷阱溫度達(dá)到-40℃時(shí),將預(yù)凍好的西林瓶放進(jìn)壓蓋干燥架中,

  把假蓋板放在冷阱上,再將干燥架放在冷阱上方,罩上壓蓋有機(jī)玻璃罩,罩下端要與“O”型密封圈完全接觸。順時(shí)針擰緊真空閥,按“真空計(jì)”鍵,顯示真空度為100~110×103,再按“真空泵”鍵,真空泵工作(真空泵的蓋子要打開),15Pa以下為正常,凍干開始。

  10.壓蓋:24h后,視感物料已完全干燥,按順時(shí)針方向轉(zhuǎn)動有機(jī)玻璃罩上方手柄,使罩中壓蓋架絲杠轉(zhuǎn)動下移,將瓶蓋壓入瓶中,實(shí)現(xiàn)在真空中壓蓋。

  11.關(guān)機(jī):按逆時(shí)針方向打開真空閥充氣,按“真空泵”鍵,真空泵停止運(yùn)轉(zhuǎn)。取下有機(jī)玻璃罩,拿出西林瓶保存。

  五、注意事項(xiàng)

  1.需滅菌的物品應(yīng)嚴(yán)格滅菌,避免污染雜菌;

  2.接種時(shí)應(yīng)該要等接種環(huán)完全冷卻后再接種;

  3.凍干時(shí),西林瓶的蓋子一定要放好,即使西林瓶中的空氣可以出來形成真空,又能在壓蓋的時(shí)候可以把蓋子蓋好。

  六、實(shí)習(xí)結(jié)果

  上圖中蓋子已經(jīng)掉了的和西林瓶中還是液體的都是實(shí)驗(yàn)失敗的,蓋子即沒掉瓶子中的菌種又是粉末狀的為實(shí)驗(yàn)成功的。

  蓋子掉了的:是因?yàn)槌闅鈺r(shí),氣流流動使瓶子掉下來。

  瓶子中還是液體的:是因?yàn)樯w子蓋的太緊,瓶中的空氣抽不出來,水分也沒抽出,導(dǎo)致瓶子中的菌種未變成粉末狀。

  七、實(shí)習(xí)總結(jié)或體會

  通過這個(gè)實(shí)習(xí),掌握了培養(yǎng)基的配制、分裝及滅菌方法;掌握了微生物的接種技術(shù);掌握了微生物的冷凍干燥保藏方法。通過實(shí)習(xí)將理性知識與感性認(rèn)識有機(jī)地結(jié)合,將書本知識用于實(shí)驗(yàn),在實(shí)驗(yàn)中更深地理解基礎(chǔ)理論,明白了需滅菌的物品應(yīng)嚴(yán)格滅菌,避免污染雜。也讓我的綜合能力與創(chuàng)新意識得到了提高。

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